一种蓖麻粗毒蛋白的提取方法 | 合法藥品大搜索
专利名称:一种蓖麻粗毒蛋白的提取方法
技术领域:
本发明涉及一种蛋白质的提取方法,更具体地说,本发明涉及一种蓖麻粗毒蛋白
的提取方法。
背景技术:
蓖麻毒蛋白(Ricin)是一种核糖体失活蛋白,最早是在1887年由Dixson从蓖麻 籽中分离出来,其分子量在64, 000
80, 000左右,目前已发现的结晶型有BI型、TL型、CI 型和D型,其中以D型毒性最强。分子量为64,
000的Ricin是由A、 B两条肽链以二硫键
共价连接的,其A链(RTA)在B链(RTB)的协助下,容易穿过细胞膜,破坏核蛋白体60S亚
单位,抑制蛋白质的合成,导致细胞死亡。Ricin的一级结构表明,A链由263个氨基酸残
基组成,分子量为32,000,是活性链,第10个残基天门冬酰胺(Asn)已糖基化,接有(Glc
Nac)2(Man)4寡糖链。A链中只有两个赖氨酸(Lys)残基, 一个位于N端第四位,另一个位于
C端附近,它们对A链的毒性作用至关重要。B链是由259个氨基酸残基组成的序列,含有 两个寡糖链(Glc
Nac)2(Man)s和(GlcNac)2(Man)7,分别与第93位和第133位上的两个Asn 残基相连,分子量为32,
000。不同品种的蓖麻及其变种的毒蛋白的氨基酸序列不完全相同。
Ricin是蓖麻毒素中毒性最强的一种,比剧毒的氢氰酸还毒(1kg氢氰酸可毒死 1. 6万人,而1kg
Ricin可毒死360万人),对人体致命量相当于眼镜蛇毒液致命量的2倍。
它对多种哺乳动物都有毒性,牛、羊这类反刍动物虽然抵抗力较强,但亦能致死。对兔(肌 肉注射)的半数致死剂量LDs。为4.
lul/kg。由于蓖麻毒蛋白的毒性,蓖麻毒蛋白已逐步应
用于医药和生物农药方面,是一种新型的很有潜力的抗癌药物和新型的生物农药。
Ricin为白色粉末或结晶型固体,无味,不溶于乙醇、乙醚、氯仿、甲苯等有机溶剂,
溶于稀酸或盐类水溶液,在饱和的硫酸铵溶液中能沉淀析出。在沸水中或者加压蒸汽处理
均可使Ricin凝固变性,失去毒性,但在干热的情况下则很难变性。现已报道的粗提方法有
乙酸溶液提取法、磷酸缓冲溶液提取法、硫酸铵沉淀法和透析法。随着基因工程技术的发
展,也已经能利用基因克隆的方法来获得Ricin...
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