Cell culture | 合法藥品大搜索
2019年11月13日—若購入之基本培養基(basalmedium)為粉末包裝,建議於配置兩天前,將血清瓶以一次水清洗三次、二次水清洗三次,於瓶口包覆鋁箔紙並貼上滅菌膠帶(寫上日期) ...
Cell culture | 細胞汙染防治與清潔
細胞汙染是細胞培養最嚴重的問題,不僅會影響細胞生長速度,更嚴重的會造成細胞型態的差異,最後,就是使細胞死亡。對於細胞培養新手來說,細胞汙染是一大威脅,時常會花很久的時間來找出汙染原因,但是,在此期間汙染可能會不段擴大。相信每間實驗室或多或少都發生過細胞污染的情形,即使再小心翼翼,也總會有”意外”發生的時候。
如何預防細胞汙染
開始細胞培養前,所有會接觸到細胞的藥品、耗材或器具等,都必須是無菌的。
培養基(Medium)選擇符合細胞的培養基固然重要,然而,培養基的乾淨程度是最直接影響細胞生長的,因此,培養基的配置方式是非常重要的,以下為ACE Biolabs 提供的方法:
若購入之基本培養基(basal medium)為粉末包裝,建議於配置兩天前,將血清瓶以一次水清洗三次、二次水清洗三次,於瓶口包覆鋁箔紙並貼上滅菌膠帶(寫上日期),高溫高壓滅菌完成後置於烘箱烘乾。配置基本培養基所使用的二次水,建議當日取用純水機所製造出來的二次水,以確保水源乾淨。粉末狀的基本培養基以二次水完全溶解後,需確認其pH值為7.2-7.4,接著在無菌操作台中以0.22 μm 濾杯(Thermo, 500 mL, 595-4520)過濾培養基至無菌血清瓶中。 完成後,取2 mL 基本培養基至3.5 cm 無菌培養皿中,存放於一般細胞培養環境(37°C, 5% CO2)中三天以上,每天觀察培養基狀態。若培養基變混濁或顯微鏡下觀察到雜質或微量的菌即為有汙染,需重新過濾或是捨棄該批培養基並且將環境重新清潔乾淨。基本培養基(basal medium)加入血清後,也需要取2 mL培養基,至3.5 cm 無菌培養皿中,存放於一般細胞培養環境(37°C, 5% CO2)中三天以上,每天觀察培養基...
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