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1.4Trypsin-EDTA作用時間勿太久,否則可能對細胞造成傷害或死亡。敲拍培養瓶不可太過猛烈,避免對細胞造成傷害或造成培養瓶裂痕而污染。2.材料:.
1. 前言:
1.1 細胞生長至高密度時,即須收集細胞,分殖至新的培養瓶中,其稀釋比例依細胞種類而異。
1.2 收集細胞方法可用trypsin-EDTA、cell scraper、離心處理等,處理方法依細胞種類而異。
1.3 Trypsin-EDTA為收集吸附型細胞常用之方法。Trypsin為胰蛋白酵素,其作用為分解細胞與瓶壁之附著蛋白, EDTA為chelating agent,其作用為去除Ca2+、Mg2+等離子,trypsin與EDTA二者共同作用,可使附著之細胞自瓶壁脫落。 除了trypsin-EDTA,亦可使用cell scraper(細胞刮勺)刮落細胞。
1.4 Trypsin-EDTA作用時間勿太久,否則可能對細胞造成傷害或死亡。敲拍培養瓶不可太過猛烈, 避免對細胞造成傷害或造成培養瓶裂痕而污染。
2. 材料:
2.1 Dulbeccos phosphate-buffered saline, Ca++/Mg++ free
2.2 trypsin-EDTA solution (0.05% trypsin-0.53mM EDTA.4Na):若為大體積包裝,建議將其以 少量分裝於無菌試管中,保存於-2...
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