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北方墨點法(英語:Northernblot),又称RNA印迹法,是分子生物学、生物化学中常用的实验方法,通過探測樣品中的RNA(或隔离的mRNA)来研究基因表达。...利用探針偵測由 ...
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北方墨點法(英語:Northern blot),又稱 RNA 墨點法,是分子生物學、生物化學中常用的實驗方法,通過探測樣品中的RNA(或隔離的mRNA)來研究基因表現。[1][2]
通過北方墨點法來檢測RNA的流程圖利用探針偵測由凝膠電泳分離出來的RNA片段,尋找含有特定序列的RNA片段。與南方墨點法相似,RNA樣品經過凝膠電泳後會按照大小分離,然後將樣品從凝膠轉印到膜上,並用與目標序列互補的標記的探針來探測。實驗結果可以根據所用探針的不同,以多種方式來觀察,但大多數都顯示的是樣品中被探測的RNA條帶的相對位置,也就是分子大小;而條帶的強度則與樣品中目標RNA的含量相關。這一方法可以測量目標RNA在不同樣品中的情況,因此已經被普遍用於研究特定基因在生物體中表現的時刻和表現量,也是這類研究中最基本的手段。
發明者是史丹佛大學的James Alwine和喬治·斯塔克(George Stark)在1977年發明,其名字是源於第一種墨點技術,南方墨點法(命名者為Edwin Southern)[1],兩者很相似,與南方墨點法主要的不同是北方墨點法探測的是RNA分子,而不是DNA分子。[3]
與南方墨點法相似,膠體可以選用瓊脂凝膠或是聚丙烯醯胺凝膠,被檢測物是RNA,「探針」(probe)是與目標序列互補的RNA、DNA序列或是寡核苷酸,但是探針至少要有25個鹼基對與目標序列互補。
Capillary blotting system setup for the transfer of RNA from an electrophoresis gel to a blotting membrane. 膠體[編輯] ...分子生物學| 醫學快紀 - Wiki Index | 合法藥品大搜索
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