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Rh血型分類鑑定[目的]了解酵介質法進行Rh血型分類鑑定的基本原理與操作方法,掌握Rh系統血型分類的有關知識。[原理]特異性免疫血型分類抗體(如抗D血清) ...
Rh血型分類鑑定
[目的]了解酵介質法進行Rh血型分類鑑定的基本原理與操作方法,掌握Rh系統血型分類的有關知識。
[原理]特異性免疫血型分類抗體(如抗D血清)多為小分子IgG型不完全抗體,在生理鹽水介質中不能與相應的紅細胞發生凝集。木瓜酵(或鳳梨蛋白酵)可以破壞紅細胞表面帶電荷的唾液酸,從而降低紅細胞表面負電荷,減少紅細胞排斥力,使紅細胞之間的距離縮小,有利於IgG類抗體在兩個紅細胞抗原位點間的連接,使經酵處理的具有相應抗原的紅細胞(被檢者紅細胞)與這類抗體之間的回應成為肉眼可見的凝集。
[試劑]
1.IgG型抗D標準血清(效價>1:64)
2.2%木瓜酵(或鳳梨蛋白酵)溶液 1%木瓜酵(或鳳梨蛋白酵)溶液1.0g溶於pH5.5的磷酸鹽緩沖鹽100ml中。
3.0.067mol/L磷酸鹽緩沖液(pH5.5)0.067mol/L Na2HPO4 5 ml和KH2PO4 95ml混合而成。
4.5%D陰性紅細胞生理鹽水懸液。
5.5%D陽性紅細胞生理鹽水懸液。
6.AB型人血清。
[器材與儀器]小試管,尖吸管,37℃溶箱,離心機,顯微鏡。
[操作]
1.製備懸液 製備被檢標本5%紅細胞生理鹽水懸液。
2.標記 取小試管3支,分別標記P(被檢標本),D+,D-,各加入抗D血清(D-管也可用AB型人血清代替),再依次分別加入5%被檢者紅細胞生理鹽水懸液、RhD陽性紅細胞和RhD陽性紅細胞生理鹽水懸液和RhD陰性紅細胞生理鹽水懸液各一滴,最後於每滴中加入1%木瓜酵溶液1滴,置37℃水...
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