農藥免疫檢測技術開發與應用(農委會) | 合法藥品大搜索
酵素連結免疫吸附分析法以抗原及抗體間特異性鍵結為原理,用以檢測及初步...了免疫分析的結果,使測定具有極高的靈敏度,在應用中一般採用商品化的試劑盒 ...
農業藥物毒物試驗所 謝玉貞‧蔣慕琰
一、前言
農藥由於具有高效率、快速、方便、廣效性、經濟效益顯著等特點而被廣泛應用於農產品生產。目前全世界使用的農藥種類超過700多種,包括殺蟲劑、除草劑、殺菌劑、生長調節劑等,長期大量地使用農藥,在得到效益的同時,也產生廣泛的副作用,農藥的過度使用和不合理使用,對生態環境造成嚴重的污染與危害。進入21世紀後,人們對食品安全、環境保護問題越來越受重視。
對於目前常見於農藥檢驗方法有生化檢驗法、儀器分析法及免疫分析法。其中免疫分析法是一種以抗體做微生物化學檢測器對化合物、酶或蛋白質等物質進行定性和定量分析的技術,能用於農藥快速檢測,主要有螢光免疫測定技術、放射免疫測定技術及酵素連結免疫吸附分析法(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)等方法,因ELISA具有高專一性、快速、靈敏、檢驗成本低及可同時進行大量樣本檢測等優點,因此具有廣泛的實際應用之價值。台灣農藥檢測目前以儀器分析法為主,其次為生化檢驗,免疫檢測法僅有少數個案利用。本文主要簡介ELISA方法,探討在台灣利用的可行性。
二、酵素連結免疫吸附分析法(ELISA)的原理
酵素連結免疫吸附分析法以抗原及抗體間特異性鍵結為原理,用以檢測及初步定量特定之抗原或抗體。ELISA的敏感性與抗原抗體間親和力有關。抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記,根據酶反應底物顯色的深淺進行定性或定量分析。由於酶的催化效率很高,間接地放大了免疫分析的結果,使測定具有極高的靈敏度,在應用中一般採用商品化的試劑盒進行測定,其特點是將抗原或抗體製成固相試劑,在與標本中抗原或抗體反應後,只需經過固相的洗滌,就可以達到抗原抗體複合物與其他物質的分離,簡化了操作步驟。酵素連結免疫吸附分析法的樣品前處理簡單,純化步驟少,大樣本分析時間短,既適合於實驗室檢測,又可用於現場篩選,具有分析速度快、經濟、簡便的特點,但抗體製備不易,而且不能完成多種農藥同時檢測,限制了該技術的應用。
三、農藥檢測免疫抗體之製作
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