6 款曲線,解決99% 的ELISA 數據擬合難題 | 合法藥品大搜索
2019年5月9日—樣本濃度的分析是根據標準品數據所生成的標準曲線完成的。要確保樣本結果的準確性,首先就要保證標準曲線盡量能還原抗原抗體的動力學反應過程。
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我們通常 ELISA實驗完成後,後面最重要的工作就是如何把 O D值轉化為濃度,以達到分析數據的目的。樣本濃度的分析是根據標準品數據所生成的標準曲線完成的。要確保樣本結果的準確性,首先就要保證標準曲線盡量能還原抗原抗體的動力學反應過程。目前,我們常用的方法是 excel 繪圖,或者用繪圖專用軟件 curve 軟件做圖。常用的函數excel 都能歸納,但是 excel 能歸納的曲線模型比較有限,而專業的 curve 軟件能擬合的回歸曲線就比較多也比較全面。所以目前專業的 curve 軟件是目前最流行的數據處理軟件之一。
我們常用的曲線擬合回歸方程主要為以下6 種:
1.直線擬合回歸方程:
直線回歸是最簡單的回歸模型, 也是最基本的曲線擬合回歸分析方法, 將所有的測試點擬合為一條直線,其擬合函數方程式為:y=a+bx
2.二次多項式擬合回歸方程:
二次多項式成拋物線狀,開口向下或者向上,在很多ELISA實驗中,擬合近似於二次多項式的升段或者降段,由於曲線的特性,同一個濃度值在曲線圖上可能表現出沒有對應的OD值、有一個OD值,或者兩個OD值,所以使用二次多項式擬合時,最好保證取值的範圍都落在曲線的升段或者降段,否則哪怕是相關係數很好也很可能與實際的值不一致。其擬合函數方程式為:y = a+bx+ cx 2,形狀如下圖:
3.三次多項式擬合回歸方程:
三次多項式像倒狀的「S」形,在實驗結果剛好在曲線的升段或者降段的時候,效果還可以,但是對於區間較廣的情形,由於其彎曲的波動,三次方程擬合模擬不一定很好,跟二次方程擬合一樣,看曲線的相關係數的同時也要看計算的點在曲線上的分佈,這樣才算出理想的結果,本軟件計算值時,選擇性的取相對於濃度或者OD值,比...
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