Recombinant Protein | His | 合法藥品大搜索

結合在介質上的His-tag蛋白可以通過提高緩衝液中的咪唑(Imidazole)濃度進行競爭性洗脫，從而得到較高純度的His-tag蛋白。在親和純化實驗中的使用最為廣泛的 ...

Recombinant Protein | His-tag 重組蛋白純化系統

His-tag 中文稱之為組氨酸標籤，His 可被鎳柱吸附，用於純化重組蛋白，無論表達的蛋白是可溶的或者包涵體都可以用固定金屬離子親和層析（IMAC）純化，是由連續六個以上的組氨酸所組合而成的一段胺基酸序列。His-tag是蛋白質重組技術中經常用到的一種標籤，其序列為6個組氨酸HHHHHH，其特點是分子量小，只有不到0.84 KD，基本不改變蛋白質的生物結構，不改變蛋白質的溶解性，更重要的是它使蛋白質的純化變得極為方便。根據組氨酸上的咪唑環可以與二價金屬離子結合的原理，His-tag 可結合在目的蛋白的 C末端或 N末端，形成特殊的結構，以便於進行下一步的純化及檢測。可以利用金屬離子親和層析技術純化帶有 His標籤的蛋白，即將含有目的蛋白的裂解液通過固定的二價金屬離子（通常是二價 Ni 離子）填料，帶有 6*His-tag的蛋白質即與填料結合，其它蛋白不與填料結合，最後再用高濃度的咪唑即可將目的蛋白洗脫下來。

一、His-tag 融合蛋白的優勢

His-tag 為分離純化蛋白質等生物工程產品最有效的技術之一。His-tag 單株抗體可以用來鑑定His-tag的蛋白質的表達情況（如目的蛋白的相對表達量、分子量）、在細胞中的定位以及其它特性。His-tag 作為蛋白純化時的首選標籤，其優勢在於：